Die touchdown-PCR

Definition

Bei der touchdown-PCR wird die Spezifität der Primer-Bindung durch zyklusweise Annäherung der Annealing-Temperatur an die zu erwartenden Schmelztemperatur des Primers (Tm) erhöht.

Wenn die Annealing-Temperatur über der zu erwartenden Tm gewählt wird, binden die Primer ausschließlich und damit hochspezifisch an die DNA. So werden Primer-Dimere und Artefakte verringert, und es vermehrt sich vorzugsweise das gewünschte Amplikon.

Temperaturprofil+der+touchdown-PCR
Abb.1Temperaturprofil der touchdown-PCR
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