Kinasierung

Bei der Kinase-Behandlung überträgt das Enzym Polynucleotid-Kinase Phosphat-Gruppen von ATP-Molekülen auf die 5'-Hydroxy-Gruppen von einzel- und doppelsträngiger DNA. Diese Phosphorylierung ist erforderlich, wenn ein synthetisch hergestelltes Oligonucleotid für eine Ligationsreaktion eingesetzt werden soll, da Oligonucleotide im Gegensatz zu biologisch hergestellten DNA-Fragmenten am 5'-Ende nicht phosphoryliert sind und so kein gutes Substrat für die Ligase darstellen.

Nach der Reaktion wird das Enzym durch eine Hitzebehandlung inaktiviert (10 $\text{min}$ bei 65 $\text{°C}$).

Kinase-Behandlung mit T4-Polynucleotid-Kinase